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Polysciences全國代理-上海鼎桑

Polysciences全國代理-上海鼎桑

更(geng)新時間:2021-03-10

產品特點:
Polysciences全國代理-上海鼎桑 美國POLYSCIENCES公司成立于1961年,主要生產和經營LIFE SCIENCES生命科學(膠體金,不含甲醛的甲醇等),病理學和顯鏡學 微球和粒子和磁珠各種單體和聚體等產品。polysciences公司是世界上zui大zui全的多聚化合物供應商,同時是世界*的免疫學,組織化學試劑耗材供應商.
產品介紹
產地進口加工定制

我們公司zui大優(you)勢是強大的采購

  上(shang)海(hai)鼎桑生(sheng)物科技(ji)有限公司(si)一(yi)家專(zhuan)注于生命科(ke)(ke)學的科(ke)(ke)技(ji)(ji)企業,由在國內科(ke)(ke)研試劑領域有著豐富從業經驗(yan)的技(ji)(ji)術(shu)團隊和管(guan)理團隊組建而成,專(zhuan)營進口生物試劑,科(ke)(ke)學儀器,實驗(yan)消耗品等。
       公(gong)司將不(bu)斷(duan)把上優(you)質(zhi)的(de)(de)產(chan)品引入國內市(shi)場,滿足客戶的(de)(de)需求,公(gong)司也將緊跟生(sheng)命科學(xue)的(de)(de)發展,為廣(guang)大科研工作者探索生(sheng)命科學(xue)的(de)(de)奧秘奉獻(xian)綿(mian)薄之力.

Polysciences全國代理-上海鼎桑

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PEI轉染手冊(ce)

轉染操作流程:
 
  1、細胞傳代:

轉染前24h內分離293T細胞至含10%胎牛血清的DMEM培養基 中進行傳代培養,接種密度如下:
         6孔板:0.5x106細胞
         10cm培養皿:4.0x106細胞
         15cm培養皿:9.0x106細胞

2、轉染

轉染前將所有(you)試劑置(zhi)于室溫。

2.1質粒DNA的稀釋

在無菌試管中,用無血清的DMEM W / O酚紅培養基(濃度為10%)稀釋質粒DNA(ug)。病毒包裝體(psPAX2):病毒包膜(pMD2G)和重組質粒DNA的稀釋比例分別為4:2:1。
       

6孔板:200ul+3ug的DNA
        10cm培養皿:1ml+7-8ug的DNA
        15cm培養皿:2ml+11-12ug的DNA

   2.2 轉染復合體形成

將PEI(1ug/uL)加入已稀釋的總DNA中,PEI與DNA(ug)的混合比率為3:1。加入后立即渦旋混合。
      

 6孔板:9ul PEI復合體(1ug/ul)=9ug
        10cm培養皿:21ul PEI復合體(1ug/ul)=21ug
        15cm培養皿:33ul PEI復合體(1ug/ul)=33ug
將添加到細胞的DNA/ PEI的混合物在室溫下孵育15分鐘。


4、收獲轉染(ran)細胞(bao)

轉染后48小時內收獲轉染細胞/或病毒上清。
 
試劑的配制:
PEI(1ug/ul) Polysciences(CAT#23966-2配制成儲液:)
1、將無內毒素的無菌水加熱至80℃左右溶解PEI,冷卻到室溫。
2、調整pH值至7.0,用0.22um的濾器過濾消毒,分裝后儲存在-20℃。工作液可保持在4℃

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