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POLYSCIENCES上海鼎桑代理

POLYSCIENCES上海鼎桑代理

更新時間:2024-04-09

產品特點:
POLYSCIENCES上海鼎桑代理 美國POLYSCIENCES公司成立于1961年,主要生產和經營LIFE SCIENCES生命科學(膠體金,不含甲醛的甲醇等),病理學和顯鏡學 微球和粒子和磁珠各種單體和聚體等產品。polysciences公司是世界上zui大zui全的多聚化合物供應商,同時是世界*的免疫學,組織化學試劑耗材供應商.
產品介紹
產地進口加工定制

代(dai)理優勢品牌:tedpella Transgenomics(IDT)  突變檢測試劑盒 mattek 培養皿  Megazyme 試劑盒Avanti  標(biao)準品Alzet 滲(shen)透壓泵 DSHB抗體moltox 菌株Toxin Technology 毒素、Jena Bioscience Goldbioteknova培(pei)養(yang)基Altogen Biosystems   轉染試劑Scientific Commodities  PE管Coriell Institute DNA和細胞 List毒素、BrainBits 培(pei)養基Spectrum 膜(mo)Neuromab 抗(kang)體(ti) BBI solutions膠體金 braintree scientific 耗材pe管AK Scientific抑(yi)制(zhi)劑等、sutter 玻璃電極管Reaschdiets小鼠食料

我們公司zui大優勢(shi)是強大的采購(gou)

  上海鼎(ding)桑生物科(ke)技有限公(gong)司一家專(zhuan)注于生命科學的科技企業(ye),由(you)在(zai)國內科研(yan)試(shi)(shi)劑(ji)領域有著豐富從業(ye)經驗的技術團隊和管(guan)理團隊組建而成,專(zhuan)營(ying)進口(kou)生物試(shi)(shi)劑(ji),科學儀器,實(shi)驗消耗品等(deng)。
       公(gong)司(si)將不斷把上優質的產品引入國(guo)內市場,滿足客戶的需求,公(gong)司(si)也將緊跟生(sheng)命科(ke)學(xue)的發展,為廣大科(ke)研工作者(zhe)探索生(sheng)命科(ke)學(xue)的奧秘(mi)奉獻綿薄之(zhi)力(li).

POLYSCIENCES上海鼎桑代理

POLYSCIENCES上海鼎桑代理

POLYSCIENCES公司成立于1961年,主要生產和經營LIFE SCIENCES生命科學(膠體金,不含甲醛的甲醇等),病理學和顯鏡學 微球和粒子和磁珠各種單體和聚體等產品。polysciences公司是世界上zui大zui全的23966上海鼎桑代理 多聚化(hua)合物供應商(shang),同(tong)時是(shi)世界*的免疫學,組織化(hua)學試劑耗材(cai)供應商(shang).

上海鼎桑polysciences 23966大量現貨供應

轉染試劑線性PEI溶液的配制(1mg/ml)

聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,PEI)是聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子,每相隔二個碳個原子,即每“第三個原子都是質子化的氨基氮原子,使得聚合物網絡在任何pH下都能充當有效的“質子海綿”(proton sponge)體。PEI,可用作轉染試劑,它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉染真核細胞。有實驗證明,分子量25000的線性PEIPolysciences 23966轉染效率zui高。

下面將主要介紹polysciences 線性PEI(#23966)的產品特性及其溶液的配制過程。

1. 產品特性(xing):

產品名稱:線性聚乙烯亞胺(PEI)

CAS號

9002-98-626913-06-4

分子(zi)式

(CH2CH2NH)n

分子量(liang)

25000

熔點

73-75°C

外觀

白色黃色固體

結構式

 

溶解性

溶(rong)于(yu)熱水,低pH值的冷水,甲醇和乙醇不溶于:苯,aether和丙酮(tong)

儲存

室溫

 

2. 溶液配制

此指導說明書是經polysciences公司研究,測試及其客戶反饋的后編寫的。下面推薦一種簡單適用而的方法,講述如何配制濃度為1mg/mL的轉染試劑的配制。

材料:

1g #23966、1L 純水(Milli-Q®純水,注射用水(WFI),或類似的生物(wu)級(ji)水)、12 M鹽酸、10 M氫氧(yang)化(hua)鈉、一(yi)次(ci)性(xing)0.1-0.2µm PES真空無(wu)菌過濾器、無(wu)菌高聚(ju)乙烯(xi)或聚(ju)丙烯(xi)試(shi)劑(ji)瓶。

器材:

1 L 玻璃燒杯、1 L玻璃量筒、核準pH計、2支1 mL塑料移液(ye)管、托盤、聚四氟乙烯(PTFE)攪(jiao)拌棒(bang)、真空泵

配制過程:

1g #23966——900mL水溶解(jie)——攪拌、加熱(re)(60-80°C)——加HCl調pH到2.0左右——蓋(gai)上燒杯,攪拌3h(直至粉末*溶解(jie))——冷卻(que)至室溫——加NaOH調pH到6.9-7.1——移(yi)液到量筒,加水補足至1L——真空過濾消(xiao)毒——分裝,-20°C保存。

備注:加熱或加酸都有助于PEI溶解。當然酸可能不用加那么多,詳細用量可試加一點攪拌看看,足夠溶解就行,不一定需要加到pH那么低。

試劑儲存:

冷凍部分溶液可在-20°C保存長達一年;部分解凍的溶液可在4°C保存2周,不可反復凍融。

粉末儲存:

未開封的粉末有效期兩年。可在室溫下保存直至使用。

轉染操作流程:(瞬時轉染方法) 轉染效率(部分數據參考,本數據來源于網絡,不作為售后投訴依據

1. 接種細胞(bao): 轉(zhuan)染前一天,用膠原(yuan)酶(mei)(WORTHINGTONG 公司 LS004196)消化細

胞并計數(不建議用胰酶)。調整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養的器皿,每個孔置

入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到 70~80%。

2. 準備 DNA-PEI 復合(he)物: DNA、PEI 試劑(ji)和稀釋劑(ji)在進行以下(xia)步驟前需先使其

升至室溫。,用 Opti-MEM ITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養基稀釋適

DNA。用同樣的培養基稀釋 PEI 試劑。每 1 μg DNA 需用 1-5 μL 線性 PEI 轉

染試劑。一邊輕輕渦旋裝有 DNA 溶液 的試管,一邊將稀釋的線性 PEI 轉染試劑滴

加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置 10~25 min 以

形成 DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如 NEST 5 mL /14

mL 離心管。

3. 轉染細胞: 直接向每個孔(kong)中加入 DNA-PEI 復合物并輕(qing)輕(qing)渦旋培養板/培養皿。在

無血清條件下轉染時,去除生長培養基,替換成無血清培養基,然后滴 DNA-PEI 復

合物。轉染 3 h 后,添加½體積的包含 30%血清的生長培養基。

4. 孵育細胞(bao)和分析(xi)結果(guo): 在 CO2 培養箱中 37℃下孵育細胞(bao)至可以分析(xi)檢(jian)測。轉

染后快 的話7 h 即可檢測到轉入基因的表達。 請自行確定適合檢測時間。

 

 

細胞種類 中文名稱 PEI 轉染效率

HEK293 人胚腎細胞(bao) 90%-95%

293-T 人(ren)胚腎細胞 90%-95%

CHO-K1 倉鼠卵巢細胞 80%-90%

U251 人(ren)源神經膠(jiao)質瘤細胞 80%-90%

Hela 人源宮(gong)頸ai細胞(bao) 70%-80%

COS7 猴 SV40 轉化(hua)腎細胞 70%-80%

HepG2 人源肝癌細胞 70%-80%

NIH/3T3 小(xiao)鼠胚胎(tai)成纖(xian)維細胞 60%-70%

膠質瘤干細胞 人源膠質瘤干細胞 60%-70%

Patu8988 人源胰腺癌細(xi)胞(bao) 60%-70%

U2OS 人源骨肉瘤細胞 60%-70%

轉染試劑和 DNA 配比數據

 

細胞型號 培養基 每孔細胞數 DNA 的量 轉染試劑量 和培養基混合 4-6h

293H DMEM 3×10

4

0.2µg 0.5µL DMEM+10%FBS

293FT DMEM 3×10

4

0.2µg 0.5µL DMEM+10%FBS

293E DMEM 3×10

4

0.2µg 0.5µL DMEM+10%FBS

293F DMEM 3×10

4

0.2µg 0.5µL DMEM+10%FBS

COS7 DMEM 1.5×10

4

0.4µg 0.5µL DMEM+10%FBS

hela DMEM 2×10

4

0.3µg 0.5µL 1640+15%FBS

Caco2 MEM 3.5×10

4

0.3µg 0.75µL MEM+10%FBS

BHK21 MEM 2×10

4

0.2µg 0.5µL MEM+10%FBS

CHO-DG44 DMEM+HT+pro 2×10

4

0.5µg 0.5µL DMEM+HT+pro +10%FBS

RAW264.7 DMEM 3×10

4

0.2µg 0.5µL DMEM +10%FBS

MCF7

MEM/NEAA+0.01mg/mL insulin + sodium

pyruvat

2×10

4

0.1µg 0.25µL

MEM/NEAA+0.01mg/mL insulin + sodium

pyruvat+10%FBS

SW480 IMDM 3×10

4

0.4µg 0.5µL IMDM +10%FBS

MDCK DMEM 4×10

4

0.6µg 1µL DMEM+10%FBS

CHO-K1 IMDM+Pro 3×10

4

0.2µg 0.5µL IMDM+Pro +10%FBS

HepG2 DMEM 3×10

4

0.5µg 0.75µL DMEM+10%FBS

A549 DMEM 2×10

4

0.3µg 0.5µL DMEM+10%FBS

NIH/3T3 DMEM 1.5×10

4

0.1µg 0.75µL DMEM+10%FBS

vero DMEM 3×10

4

0.3µg 0.75µL DMEM+10%FBS

sf9 SIM SF 5×10

4

0.4µg 0.75µL SIM SF+10%FBS



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