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POLYSCIENCES上海鼎桑代理

POLYSCIENCES上海鼎桑代理

更新時(shi)間:2021-03-10

產品特點:
POLYSCIENCES上海鼎桑代理 美國POLYSCIENCES公司成立于1961年,主要生產和經營LIFE SCIENCES生命科學(膠體金,不含甲醛的甲醇等),病理學和顯鏡學 微球和粒子和磁珠各種單體和聚體等產品。polysciences公司是世界上zui大zui全的多聚化合物供應商,同時是世界*的免疫學,組織化學試劑耗材供應商.
產品介紹
產地進口加工定制

代理優(you)勢品牌:tedpella Transgenomics(IDT)  突變(bian)檢測試劑盒 mattek 培養(yang)皿  Megazyme 試(shi)劑盒Avanti  標準品Alzet 滲(shen)透壓泵 DSHB抗體moltox 菌(jun)株Toxin Technology 毒素、Jena Bioscience Goldbioteknova培養(yang)基Altogen Biosystems   轉染(ran)試(shi)劑(ji)Scientific Commodities  PE管Coriell Institute DNA和細胞(bao) List毒素、BrainBits 培(pei)養(yang)基Spectrum 膜Neuromab 抗體(ti) BBI solutions膠體金 braintree scientific 耗(hao)材pe管(guan)AK Scientific抑(yi)制劑(ji)等、sutter 玻璃電極管Reaschdiets小鼠食料

我們公司zui大優勢是強大的采購(gou)

  上海鼎桑(sang)生(sheng)物科技有限公司(si)一(yi)家專注于生命科(ke)學的科(ke)技企業,由在國內科(ke)研(yan)試劑領域有(you)著(zhu)豐富從業經驗(yan)的技術團(tuan)隊和管理團(tuan)隊組建而成,專營(ying)進口生物試劑,科(ke)學儀(yi)器,實驗(yan)消耗(hao)品等。
       公(gong)司將不斷把上優質的(de)(de)產品引入國內市場,滿(man)足客戶的(de)(de)需求(qiu),公(gong)司也(ye)將緊跟生(sheng)命科學(xue)的(de)(de)發展(zhan),為廣大科研工作(zuo)者探索生(sheng)命科學(xue)的(de)(de)奧秘(mi)奉獻綿(mian)薄之(zhi)力.

POLYSCIENCES上海鼎桑代理

POLYSCIENCES上海鼎桑代理

POLYSCIENCES公司成立于1961年,主要生產和經營LIFE SCIENCES生命科學(膠體金,不含甲醛的甲醇等),病理學和顯鏡學 微球和粒子和磁珠各種單體和聚體等產品。polysciences公司是世界上zui大zui全的23966上海鼎桑代理 多聚(ju)化合物供(gong)應商,同時是世界(jie)*的免(mian)疫學,組織(zhi)化學試(shi)劑(ji)耗(hao)材供(gong)應商.

上海鼎桑polysciences 23966大量現貨供(gong)應

轉染試劑線性PEI溶液的配制(1mg/ml)

聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,PEI)是聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子,每相隔二個碳個原子,即每“第三個原子都是質子化的氨基氮原子,使得聚合物網絡在任何pH下都能充當有效的“質子海綿”(proton sponge)體。PEI,可用作轉染試劑,它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉染真核細胞。有實驗證明,分子量25000的線性PEIPolysciences 23966轉染效率zui高。

下面將主要介紹polysciences 線性PEI(#23966)的產品特性及其溶液的配制過程。

1. 產品特(te)性:

產品名稱:線性聚乙烯亞胺(PEI)

CAS號(hao)

9002-98-626913-06-4

分子式(shi)

(CH2CH2NH)n

分子量

25000

熔點(dian)

73-75°C

外觀

白(bai)色黃色(se)固體

結構式

 

溶解(jie)性

溶于(yu)熱水,低pH值的冷水,甲醇和乙醇不溶于:苯,aether和(he)丙酮

儲存

室(shi)溫

 

2. 溶液(ye)配(pei)制

此指導說明書是經polysciences公司研究,測試及其客戶反饋的后編寫的。下面推薦一種簡單適用而的方法,講述如何配制濃度為1mg/mL的轉染試劑的配制。

材料:

1g #23966、1L 純(chun)水(Milli-Q®純(chun)水,注(zhu)射用水(WFI),或(huo)類(lei)似的生(sheng)物級水)、12 M鹽酸、10 M氫氧(yang)化鈉、一次性0.1-0.2µm PES真(zhen)空無菌過濾器、無菌高(gao)聚乙烯(xi)或(huo)聚丙烯(xi)試劑(ji)瓶(ping)。

器材:

1 L 玻(bo)璃燒(shao)杯、1 L玻(bo)璃量筒、核準(zhun)pH計、2支1 mL塑料移液管、托盤、聚四氟乙(yi)烯(PTFE)攪拌(ban)棒、真(zhen)空(kong)泵

配制過程:

1g #23966——900mL水(shui)溶解(jie)——攪(jiao)拌、加熱(60-80°C)——加HCl調pH到2.0左右——蓋上(shang)燒杯,攪(jiao)拌3h(直至粉(fen)末*溶解(jie))——冷(leng)卻至室溫——加NaOH調pH到6.9-7.1——移液(ye)到量筒,加水(shui)補足(zu)至1L——真(zhen)空過濾(lv)消毒——分裝,-20°C保存。

備注:加熱或加酸都有助于PEI溶解。當然酸可能不用加那么多,詳細用量可試加一點攪拌看看,足夠溶解就行,不一定需要加到pH那么低。

試劑儲存:

冷凍部分溶液可在-20°C保存長達一年;部分解凍的溶液可在4°C保存2周,不可反復凍融。

粉末儲存:

未開封的粉末有效期兩年。可在室溫下保存直至使用。

轉染操作流程:(瞬時轉染方法) 轉染效率(部分數據參考,本數據來源于網絡,不作為售后投訴依據

1. 接(jie)種細(xi)胞: 轉染前一天,用膠原(yuan)酶(WORTHINGTONG 公(gong)司 LS004196)消化細(xi)

胞并計數(不建議用胰酶)。調整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養的器皿,每個孔置

入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到 70~80%。

2. 準(zhun)備(bei) DNA-PEI 復合(he)物: DNA、PEI 試劑和稀(xi)釋劑在進行以(yi)下步驟前(qian)需先使(shi)其

升至室溫。,用 Opti-MEM ITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養基稀釋適

DNA。用同樣的培養基稀釋 PEI 試劑。每 1 μg DNA 需用 1-5 μL 線性 PEI 轉

染試劑。一邊輕輕渦旋裝有 DNA 溶液 的試管,一邊將稀釋的線性 PEI 轉染試劑滴

加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置 10~25 min 以

形成 DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如 NEST 5 mL /14

mL 離心管。

3. 轉染細胞: 直接向每個孔(kong)中加入 DNA-PEI 復合(he)物(wu)并(bing)輕輕渦旋培養(yang)(yang)板/培養(yang)(yang)皿。在

無血清條件下轉染時,去除生長培養基,替換成無血清培養基,然后滴 DNA-PEI 復

合物。轉染 3 h 后,添加½體積的包含 30%血清的生長培養基。

4. 孵(fu)育(yu)細胞(bao)和分析結果: 在 CO2 培養(yang)箱中 37℃下孵(fu)育(yu)細胞(bao)至可以分析檢(jian)測(ce)。轉

染后快 的話7 h 即可檢測到轉入基因的表達。 請自行確定適合檢測時間。

 

 

細胞種類 中文名稱 PEI 轉染效率

HEK293 人胚腎(shen)細胞 90%-95%

293-T 人胚腎細胞 90%-95%

CHO-K1 倉鼠卵巢細胞 80%-90%

U251 人源(yuan)神經膠質瘤細胞 80%-90%

Hela 人源(yuan)宮頸ai細胞 70%-80%

COS7 猴(hou) SV40 轉化腎(shen)細胞 70%-80%

HepG2 人源肝(gan)癌細胞(bao) 70%-80%

NIH/3T3 小鼠(shu)胚胎成纖維細胞 60%-70%

膠質瘤干細胞 人源膠質瘤干細胞 60%-70%

Patu8988 人源胰腺(xian)癌細胞 60%-70%

U2OS 人源(yuan)骨肉瘤細胞 60%-70%

轉染試劑和 DNA 配比數據

 

細胞型號 培養基 每孔細胞數 DNA 的量 轉染試劑量 和培養基混合 4-6h

293H DMEM 3×10

4

0.2µg 0.5µL DMEM+10%FBS

293FT DMEM 3×10

4

0.2µg 0.5µL DMEM+10%FBS

293E DMEM 3×10

4

0.2µg 0.5µL DMEM+10%FBS

293F DMEM 3×10

4

0.2µg 0.5µL DMEM+10%FBS

COS7 DMEM 1.5×10

4

0.4µg 0.5µL DMEM+10%FBS

hela DMEM 2×10

4

0.3µg 0.5µL 1640+15%FBS

Caco2 MEM 3.5×10

4

0.3µg 0.75µL MEM+10%FBS

BHK21 MEM 2×10

4

0.2µg 0.5µL MEM+10%FBS

CHO-DG44 DMEM+HT+pro 2×10

4

0.5µg 0.5µL DMEM+HT+pro +10%FBS

RAW264.7 DMEM 3×10

4

0.2µg 0.5µL DMEM +10%FBS

MCF7

MEM/NEAA+0.01mg/mL insulin + sodium

pyruvat

2×10

4

0.1µg 0.25µL

MEM/NEAA+0.01mg/mL insulin + sodium

pyruvat+10%FBS

SW480 IMDM 3×10

4

0.4µg 0.5µL IMDM +10%FBS

MDCK DMEM 4×10

4

0.6µg 1µL DMEM+10%FBS

CHO-K1 IMDM+Pro 3×10

4

0.2µg 0.5µL IMDM+Pro +10%FBS

HepG2 DMEM 3×10

4

0.5µg 0.75µL DMEM+10%FBS

A549 DMEM 2×10

4

0.3µg 0.5µL DMEM+10%FBS

NIH/3T3 DMEM 1.5×10

4

0.1µg 0.75µL DMEM+10%FBS

vero DMEM 3×10

4

0.3µg 0.75µL DMEM+10%FBS

sf9 SIM SF 5×10

4

0.4µg 0.75µL SIM SF+10%FBS



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